本文摘要
這篇文章來(lái)自于馬爾文帕納科的優(yōu)秀用戶——晶云藥物,筆者結(jié)合晶云助力客戶項(xiàng)目申報(bào)的經(jīng)驗(yàn),就晶型藥物定性定量研究的意義以及研究方法進(jìn)行分享。
2022年10月馬爾文帕納科與晶云藥物聯(lián)手成立粉末衍射與粒度分析藥物晶型研究聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室,為藥物晶型研究、制劑研發(fā)生產(chǎn)等醫(yī)藥研發(fā)貢獻(xiàn)更多力量。
你是否還在為如下晶型定性定量研究困擾?
化合物有多晶型現(xiàn)象,原料藥和制劑是否必須開(kāi)展雜質(zhì)晶型研究?
晶型質(zhì)量控制如何決策?是否需要引入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)?
晶型定量研究的方法有哪些,如何選擇合適的方法?
采用XRPD方法,如何開(kāi)展定性定量研究?
晶型定量的方法學(xué)驗(yàn)證如何開(kāi)展?
01丨引言
藥物的多晶型現(xiàn)象普遍存在,不同晶型的理化性質(zhì)也會(huì)存在差異,包括形貌、熔點(diǎn)、溶解度和溶解速率、甚至穩(wěn)定性等,最終影響藥品的穩(wěn)定性、溶解度和生物利用度。
根據(jù)9015藥品晶型研究及晶型質(zhì)量控制指導(dǎo)原則
晶型定性檢測(cè)方法:絕對(duì)鑒別方法是可獨(dú)立完成晶型物質(zhì)狀態(tài)鑒別的方法,如單晶X射線衍射法(SXRD)和微晶電子衍射法(Micro ED)。
相對(duì)鑒別方法則是采集供試品的數(shù)據(jù)與已知晶型樣品的圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì),方法有偏光顯微鏡法(PLM)、粉末X射線衍射法(PXRD)、拉曼光譜法(Raman)、差示掃描量熱法(DSC)、紅外光譜法(IR)、動(dòng)態(tài)水吸附法(DVS)、熱重法(TGA)等。
晶型定量檢測(cè)方法:包括SXRD、PXRD、DSC、IR和DVS等。其中常用的方法是X射線粉末衍射法(XRPD法),本文也將結(jié)合晶云的項(xiàng)目經(jīng)驗(yàn),探討晶型定性/定量中XRPD的方法學(xué)研究。
02丨藥品晶型鑒別/檢查項(xiàng)的決策
對(duì)于晶型定性/定量研究的深度以及監(jiān)管的要求,仿制藥可參考《化學(xué)仿制藥晶型研究技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》以及原研質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
決策樹(shù)1
決策樹(shù) 2
決策樹(shù)3
對(duì)于新藥化合物,在整個(gè)研究過(guò)程中,需監(jiān)測(cè)原料藥以及制劑中的原料藥晶型。另外,結(jié)合前期系統(tǒng)的多晶型篩選與評(píng)估,在充分了解各晶型間轉(zhuǎn)化關(guān)系的基礎(chǔ)上,判斷后續(xù)的工藝以及存儲(chǔ)過(guò)程中,是否存在轉(zhuǎn)晶的風(fēng)險(xiǎn)。若過(guò)程中存在轉(zhuǎn)晶風(fēng)險(xiǎn),建議開(kāi)展晶型定量研究。
03丨晶型定性/定量研究方法
定性研究
對(duì)于原料藥晶型的定性分析,可借助已知晶型信息,利用相對(duì)晶型鑒別方法確定供試品晶型與已知晶型樣品的圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)。
對(duì)于制劑樣品中原料藥的晶型定性分析,其難點(diǎn)在于制劑為混合物,受載藥量、各輔料固體形態(tài)、多種活性成分(復(fù)方)以及制備工藝的影響,因此需開(kāi)發(fā)靈敏度足夠的XRPD方法用于分析制劑。
需要注意的是,輔料也存在多晶型現(xiàn)象(乳糖,硬脂酸鎂,甘露醇),前期研究中也建議在同樣的穩(wěn)定性條件下放置空白制劑,并與制劑樣品一并檢測(cè),以排除制劑中輔料轉(zhuǎn)晶的干擾。對(duì)于含有部分特殊組分的制劑樣品,例如磷酸氫鈣、紅氧化鐵等,金屬元素的存在將會(huì)吸收入射X射線,制樣時(shí)需要注意減少樣品用量,否則,得到的響應(yīng)強(qiáng)度過(guò)低,可能影響最終結(jié)論。因此,制劑處方組成也是研究的重要信息。
晶云團(tuán)隊(duì)采用透射模式(圖1為流程),制劑樣品無(wú)需研磨、粉碎,可避免前處理帶來(lái)的轉(zhuǎn)晶風(fēng)險(xiǎn),該方法適用于片劑、微丸、油膏、膜劑、噴霧劑、混懸劑等劑型。
圖1 透射模式流程圖
注意事項(xiàng):
標(biāo)準(zhǔn)品選擇,特異性,關(guān)注測(cè)試過(guò)程中是否有轉(zhuǎn)晶風(fēng)險(xiǎn),取樣代表性
定量研究
晶型物質(zhì)含量是表征供試品中所包含的某種特定晶型物質(zhì)成分量值,用百分?jǐn)?shù)表示晶型含量。晶型含量分析方法指進(jìn)行供試品晶型成分的定量或限liang分析。
基于XRPD的定量分析方法又包括全譜擬合法和單峰法。全譜擬合法是依賴于將實(shí)測(cè)譜圖與計(jì)算譜圖進(jìn)行比較,并通過(guò)最小二乘等方法使二者間的差異最小化,從而實(shí)現(xiàn)物相含量的定量,包括Rietveld類方法,全譜分解法,化學(xué)計(jì)量法等。而單峰法依賴于對(duì)目標(biāo)物相的某一個(gè)或某一組特征衍射峰的強(qiáng)度進(jìn)行測(cè)量,包括外標(biāo)法,內(nèi)標(biāo)法,參考強(qiáng)度比值法(RIR法),矩陣沖洗法等。在實(shí)際研究中,單峰法的運(yùn)用相對(duì)簡(jiǎn)單,對(duì)樣品的要求較低,靈敏度也相對(duì)較高,較全譜擬合法的適用性更廣。
在項(xiàng)目實(shí)際開(kāi)展過(guò)程中,需要關(guān)注:
圖2 方法學(xué)驗(yàn)證項(xiàng)研究?jī)?nèi)容(根據(jù)中國(guó)藥典及ICH Guideline)
注意事項(xiàng):
限度制定,標(biāo)準(zhǔn)品選擇,對(duì)照品配制及驗(yàn)證,定量原理(目標(biāo)物理量與晶型物質(zhì)含量相關(guān)性),方法學(xué)驗(yàn)證,取樣代表性,方法可轉(zhuǎn)移性
04丨案例分享
案例 1 制劑中原料藥晶型定性分析
制劑樣品為混合物,結(jié)合載藥量以及處方信息,開(kāi)發(fā)靈敏度足夠的XRPD表征方法。采集制劑樣品、原料藥以及空白輔料的XRPD譜圖,將制劑中不受輔料影響的衍射峰與原料藥晶型的XRPD圖進(jìn)行對(duì)比,以確定制劑中原料藥的晶型。
以抗腫瘤藥達(dá)沙替尼片為例,采用XRPD方法定性分析兩款達(dá)沙替尼市售藥品,百時(shí)美施貴寶(BMS)的施達(dá)賽®制劑中原料藥晶型為一水合物H1-7(MH H1-7),而依尼舒®中原料藥晶型為無(wú)水晶型N-6(AH N-6)。
案例 2 定量研究
碳酸鑭產(chǎn)品(zhuan利CN 101484798A)原研采用X-射線衍射法檢測(cè)堿式碳酸鑭,對(duì)原料藥以及制劑中可能存在堿式碳酸鑭晶型I和晶型II進(jìn)行定量分析。對(duì)于該品種,需開(kāi)發(fā)靈敏度足夠的適用于晶型定量分析的XRPD方法,建立晶型質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
以碳酸鑭咀嚼片中晶型I和晶型II含量研究為例,采集四水合碳酸鑭、晶型I、晶型II以及空白輔料X射線衍射圖譜進(jìn)行比較,確定堿式碳酸鑭晶型I以及晶型II的特征峰,需要關(guān)注該特征峰的專屬性、響應(yīng)強(qiáng)度、是否有擇優(yōu)取向的影響。
開(kāi)發(fā)靈敏度足夠的XRPD方法并進(jìn)行系統(tǒng)的驗(yàn)證。采用單峰法,選取每個(gè)晶型的特征峰,計(jì)算峰高強(qiáng)度比或者峰面積強(qiáng)度比,得出目標(biāo)晶型中雜質(zhì)晶型含量的定量標(biāo)準(zhǔn)曲線,各項(xiàng)驗(yàn)證也都通過(guò),該方法可用于碳酸鑭咀嚼片的定量分析。
小結(jié)
晶云藥物專注于藥物晶型研究十幾年,已為數(shù)百家客戶完成超過(guò)300個(gè)品種的制劑中晶型定性研究,超70個(gè)晶型定量研究項(xiàng)目。結(jié)合大量的項(xiàng)目研究經(jīng)驗(yàn),晶云藥物采用XRPD方法開(kāi)展原料藥和制劑中晶型定性、定量研究,除常規(guī)片劑、膠囊晶型定性定量分析外,還成功開(kāi)展干混懸劑、軟膏劑、貼劑、粉霧劑、噴霧劑、混懸劑等劑型的研究。
儀器設(shè)備
晶云藥物配有十多臺(tái)XRPD儀器,測(cè)試模式包含反射模式和透射模式,可以滿足原料藥、制劑樣品的晶型定性、定量分析需求。
馬爾文帕納科第二代、第三代Empyrean銳影
此外,晶型定性定量研究采用XRPD方法無(wú)法實(shí)現(xiàn)時(shí),可考慮結(jié)合拉曼(Raman)或者固體核磁(ssNMR)。借助設(shè)備,并開(kāi)發(fā)合適的分析方法。拉曼(Raman)以及固體核磁(ssNMR)的定性定量研究,晶云積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)。